Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
93
Hình. 9.10 Sau 10 phút, thành phần thấp hơn
trong ống tiêm được đẩy ra ngoài. (Được xuất bản
dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
Hình. 9.11 Loại bỏ thành phần bên dưới của ống
tiêm (Được xuất bản dưới sự cho phép của © Ma-
rio Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 9.12 Hộp đựng bằng sắt vào khay Microfat
lưu trữ thành phần thấp hơn của ống tiêm. (Được
xuất bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 9.13 Đánh giá kính hiển vi mô ghép mỡ
được xử lý với quá trình lắng đơn vị trọng lực. Các
mũi tên màu đỏ cho biết các vùng tập trung của
các tế bào hồng cầu. Các mũi tên màu xanh lam
xác định các giọt lipid tự do. (Được xuất bản dưới
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu)
Chương 9
So sánh các kỹ thuật khác nhau của cấy ghép mỡ
94
Hình. 9.14 Đánh giá kính hiển vi mô ghép mỡ được
xử lý với quá trình lắng đơn vị trọng lực. các mũi
tên màu đỏ cho biết các vùng tập trung của các tế
bào hồng cầu. mũi tên xanh xác định các giọt lipid
tự do. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 9.15 Đánh giá bằng kính hiển vi chỉ ra rằng
các mảnh ghép được chuẩn bị bằng cách rửa
bằng lọc với hệ thống Goisis có hàm lượng hồng
cầu thấp hơn cũng như giảm sự hiện diện của các
giọt lipid tự do vi mô so với các mảnh ghép được
chuẩn bị bằng phương pháp hấp thụ trọng lực
hoặc lắng. (Được xuất bản dưới sự cho phép của
© Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 9.16 Mẫu sau khi gạn (Được xuất bản với
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu
Hình. 9.17 Mẫu sau khi ly tâm (Đã xuất bản giấy
phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được
bảo lưu
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
95
Hình. 9.18 Mẫu sau khi rửa bằng lọc. (Được xuất
bản theo sứ mệnh của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
Hình. 9.19 Dịch hút được đổ từ ống tiêm vào các
mảnh băng lớn (3 x 8 inch) của băng Telfa không
dính (Covidien, Mans Field, Mass.). Tất cả các quy
trình đều tiếp xúc với không khí và khả năng nhiễm
bẩn. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 9.20 Mỡ được cán nhẹ và nhào dọc theo
miếng gạc bằng cách sử dụng dao mổ vô trùng.
Thủ tục rất lâu và tốn thời gian. (Được xuất bản
dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
Hình. 9.21 Ly tâm: lực ly tâm làm tổn thương các
tế bào mỡ. Số lượng lớn nhất ASC tập trung ở đáy
ống tiêm bởi lực ly tâm và là mô ghép bị loại bỏ.
Các vùng màu đỏ của các tế bào hồng cầu tập
trung. Các mũi tên màu xanh lam xác định. (Được
xuất bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Chương 9
So sánh các kỹ thuật khác nhau của cấy ghép mỡ
96
Hình. 9.23 Hệ thống Lipogem: tổn thương tế bào
mỡ do phá vỡ cơ học. (Được xuất bản dưới sự cho
phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được
bảo lưu)
Hình. 9.25 Trong quá trình thu hoạch, do ống
cannula bị dính chặt nên độ hút chân không kém.
Nguy cơ nhiễm trùng cao và thời gian thu hoạch
kéo dài (hiệu quả kém). (Được xuất bản dưới sự
cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu)
Hình. 9.22 Lọc bằng fastkit / PRL: tổn thương do
nén (phụ thuộc vào người vận hành), thiếu lọc tế
bào máu và gây tê cục bộ. (Được xuất bản dưới
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu)
Hình. 9.24 Hệ thống Regenlab. Mũi tên xanh cho
thấy phần đính kèm của ống cannula. (Được xuất
bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018.
Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 9.26 Theo hướng dẫn của nhà sản xuất,
chất béo được di chuyển 20 lần giữa 2 ống tiêm
để trộn với dung dịch nước muối. Bằng cách này,
các tế bào mỡ bị hư hỏng. (Được xuất bản dưới
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu)
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
97
9.2 Loại bỏ các chất ô nhiễm và
nước
Việc loại bỏ các chất gây ô nhiễm và nước
là rất quan trọng để đánh giá chất lượng của
quy trình ghép.
Trên thực tế, mục đích của tất cả các quy
trình xử lý chất béo là loại bỏ ra khỏi chất béo
các thành phần không thể sống được, tiền
viêm và độc hại, bao gồm các tế bào máu,
các chất thuốc tê tại chỗ được sử dụng để
xâm nhập, tàn dư của các tế bào mỡ bị vỡ,
bao gồm các giọt dầu và tế bào mảnh vụn.
Tất cả các thành phần này đều làm hỏng các
tế bào mỡ.
Hơn nữa, điều quan trọng là phải loại bỏ
thành phần nước khỏi chất béo. Nước trộn
với chất béo thực sự tạo ra thể tích giả, biến
mất ngay sau khi ghép.
Để đánh giá việc loại bỏ các chất gây ô
nhiễm và nước theo các phương pháp khác
nhau, chúng tôi đo mật độ khác nhau của
các thành phần sau khi ly tâm.
9.2.1 Phương pháp
Mẫu mỡ hút được lấy từ 10 người hiến
tặng khỏe mạnh với sự đồng ý được thông
báo, phù hợp với hướng dẫn của AeQ. Tất
cả các mẫu mỡ được thu hoạch bằng công
nghệ tiêu chuẩn (ống cannula Coleman, ống
tiêm 10 cc).
Sau đó mẫu mỡ được xử lý bằng các kỹ
thuật khác nhau.
Sau khi xử lý, các mẫu từ mỗi phương
pháp xử lý ghép được ly tâm ở 400 g trong
6 phút ở nhiệt độ phòng. Sau khi ly tâm, các
thành phần có mật độ khác nhau sẽ được đo.
Từ dưới lên trên: một thành phần bao gồm
các tế bào gốc và phần mạch đệm, các mảnh
vi mạch và chất nền ngoại bào, một lớp chất
lỏng nước bao gồm dung dịch gây tê còn lại
hoặc dung dịch rửa, mô mỡ, dầu và lớp lipid
tự do. Các dữ liệu thể tích của các lớp khác
nhau được ghi lại và báo cáo dưới dạng tỷ lệ
tương đối của tổng thể tích tiền ly tâm của
chúng.
9.2.2 Kết quả
Các mảnh ghép được làm bằng phương
pháp lắng trọng lực có giá trị cao nhất hàm
lượng nước tương đối, trong khi các mảnh
ghép được chuẩn bị bằng cách ly tâm có
hàm lượng nước thấp nhất. Các mảnh ghép
được chuẩn bị bằng cách sử dụng hệ thống
Puregraft và Goisis có mức chất lỏng vừa
phải là nước; các mức này thấp hơn đáng
kể so với các mức đối chứng và mảnh ghép
trọng lực.
Mức độ lipid - dầu tự do trong các mảnh
ghép được chuẩn bị bằng cách rửa và lọc
thấp hơn có ý nghĩa thống kê so với các mảnh
ghép đối chứng, ghép trọng lực và ghép được
chuẩn bị bằng phương pháp liên hợp. Phân
tích các tế bào cho thấy rằng kỹ thuật ly tâm
và lắng bằng trọng lực đã loại bỏ khoảng 50%
hồng cầu và 60-70% bạch cầu có trong dịch
hút ban đầu. Bằng cách ngược lại, rửa bằng
lọc bằng hệ thống Goisis và Puregraft đã loại
bỏ hơn 95% cả hai loại tế bào máu. Lăn Telfa
loại bỏ nước, dầu và các chất bẩn. Tuy nhiên,
kỹ thuật này khá lâu và tốn nhiều công sức.
Kết quả được thể hiện trong Hình. 9.16–
9.18.
Kết quả đánh giá của chúng tôi được báo
cáo trong Bảng 9.1.
Chương 9
So sánh các kỹ thuật khác nhau của cấy ghép mỡ
98
Bảng 9.1 Tỷ lệ các thành phần khác nhau được phân loại theo tỷ lệ phần trăm cao, trung
bình và thấp
Bảng 9.2 Tích lũy sự tiếp xúc của các hệ thống khác nhau với không khí và nhiễm trùng
Oil
Tê tại chỗ
Rửa
Tế bào máu
Telfa rolling
Thấp
Thấp
Không có
Thấp
Coleman
Thấp
Thấp
Không có
Trung bình
Lắng đọng
Cao
Cao
Không có
Cao
Lipogems
Thấp
Thấp
Cao
Thấp
Puregraft
Thấp
Thấp
Trung bình
Thấp
PRL
Cao
Cao
Không có
Cao
Bộ Microfat
Thấp
Thấp
Trung bình
Thấp
Hộp Microfat
Thấp
Thấp
Trung bình
Thấp
Hệ thống tránh tiếp xúc
không khí
Phương pháp đóng
Telfa rolling
Không
Không
Coleman
Không
Không
Lắng đọng
Có
Không
Lipogems
Có
Không
Puregraft
Có
Không
PRL
Có
Không
Bộ Micrograft
Có
Có
Hộp Micrograft
Có
Có
9.3 Để tránh tiếp xúc trực tiếp
giữa chất béo và không khí và
giảm nguy cơ ô nhiễm
Không khí có tác động tiêu cực đến các
tế bào mỡ, vì các thành phần gây cháy và
quá trình oxy hóa sẽ kích hoạt nó. Điều quan
trọng là tránh tiếp xúc với không khí [5].
Nhiễm trùng là những biến chứng có thể
xảy ra khi ghép mỡ. Các phương pháp khép
kín được sử dụng để việc xử lý tránh tiếp xúc
với chất béo, giảm nguy cơ tiếp xúc với vi khu-
ẩn (Bảng 9.2).
9.4 Bảo tồn số lượng tế bào gốc
mỡ khả thi cao nhất (ASCs)
Để bảo tồn và tập trung số lượng tế bào
gốc mô mỡ sống (ASC) cao nhất, điều quan
trọng là phải đánh giá chất lượng của mô
ghép mỡ. biện pháp phòng ngừa được thông
báo bởi “lý thuyết thay thế vật chủ.”
Lý thuyết này quy định rằng hầu hết các
tế bào mỡ được ghép sẽ chết sau khi tiêm, và
chất nền ngoại bào còn lại đóng vai trò như
một giá đỡ cho các tế bào thay thế của người
cho và người nhận, giúp tái tạo mô.
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
99
Bảng 9.3 Số lượng tế bào gốc của 6 mẫu khác nhau được đo. Ba mẫu liên quan đến kỹ thuật
Goisis, có giá trị cao ngay sau khi thu hoạch sau khi xử lý và sau khi đi qua ống cannula 22G.
3 mẫu cuối cùng liên quan đến kỹ thuật Coleman với một thay đổi rất quan trọng: chất béo
Coleman được đưa qua ống cannula 22G
72H SAU NHUỘM
7 NGÀY SAU NHUỘM
14 NGÀY SAU NHUỘM
Thu hoạch
Goisis
xử lý
Goisis
xử lý
Coleman
Tiêm Coleman
Thu hoạch
Coleman
Tiêm Goisis
Trong quá trình tái tạo này, ASC đóng một
vai trò quan trọng. Do đó, việc lưu giữ nồng
độ cao nhất của tế bào gốc mô mỡ (ASCs)
được chứng minh để cải thiện khả năng duy
trì chất béo, với tiềm năng phát triển của tế
bào gốc trung mô có nguồn gốc từ mô mỡ
được coi là một yếu tố góp phần chính. [6, 7].
Theo kết quả của Trevisonno và cộng sự,
kích thước nhỏ của cannula có thể mang lại
lợi thế trong việc giảm thu hoạch chất béo có
tổ chức tốt, chủ yếu bao gồm các tế bào mỡ
trưởng thành và cải thiện việc thu thập nhiều
lớp mô mỡ bề mặt hơn, có liên quan đến tỷ lệ
ADSC cao hơn [8].
Đặc biệt, họ đã quan sát thấy sự gia tăng
gấp 2 lần năng suất phục hồi của tế bào gốc
trong chất béo được thu hoạch bằng cách
sử dụng ống cannula nhỏ 2 mm (đường
kính cổng 1 mm) so với chất béo được thu
hoạch bằng ống cannula có đường kính 3
mm (đường kính cổng: 3 × 9 mm). Tầm quan
trọng của mọi bước (thu hoạch, xử lý và tiêm)
trong việc bảo tồn số lượng tế bào gốc Ad-
ipose (ASC) có thể sống cao nhất đã được
thảo luận bởi Goisis và cộng sự Imcas 2019
(Goisis và cộng sự, so sánh các giao thức,
IMCAS 2019) tế bào gốc của 6 mẫu khác
nhau được đo ở 72 giờ, 7 ngày và 14 ngày sau
khi thu mẫu. Ba mẫu liên quan đến kỹ thuật
Goisis, với giá trị tế bào gốc cao ngay sau
khi thu hoạch bằng Goisis Cannula (6443,
7596, 8950), sau khi xử lý bằng Hệ thống Go-
isis (5601, 6300, 6500) và sau khi đi qua ống
cannula 22G (3976 (5950, 6460). 3 mẫu cuối
cùng có liên quan đến kỹ thuật Coleman với
một sửa đổi rất đáng kể: chất béo Coleman
được đưa qua ống cannula 22G. Giá trị của
các tế bào gốc sau khi thu hoạch bằng can-
nula Coleman là 5180, 5930 và 7410. Giá trị
sau khi xử lý Coleman (ly tâm) là 4940, 4210
và 5140. Nhưng sau khi đi qua ống 22G, các
tế bào gốc đã bị phá hủy bởi mức độ lực đứt
gãy cao, với mức xung quanh bằng không.
(xem bảng 9.3).
9.5 Đạt được mức hiệu quả tốt
Hiệu quả của phương pháp có thể được
đánh giá về thời gian tiêu thụ, chi phí của thủ
tục và sự mất chất béo trong quá trình chuẩn
bị.
Về thời gian tiêu thụ, việc lựa chọn cannu-
la thu hoạch rất quan trọng. Thông thường,
việc sử dụng các ống cannula nhỏ có cổng
nhỏ làm giảm độ nhớt của chất béo thu
hoạch nhưng làm tăng thời gian của quy
trình. Một ngoại lệ là ống Goisis. Trên thực tế,
hút mỡ bằng ống cannula Goisis được thực
Chương 9
So sánh các kỹ thuật khác nhau của cấy ghép mỡ
100
hiện với một chuyển động quay. Cạnh lõm
của các cổng thúc đẩy sự xâm nhập của chất
béo vào lỗ. Gờ nhô lên tạo điều kiện thuận
lợi cho việc tách các hạt mỡ. Bằng cách này,
hình dạng của nhiều cổng tạo ra một lượng
lớn mô được hút với mỗi vòng quay. Do đó,
việc sử dụng cannula Goisis hiệu quả hơn
nhiều lần so với cannula thu hoạch Coleman
(nhanh hơn khoảng gấp đôi so với cannula 3
mm Coleman).
Hiệu quả giảm béo là rất quan trọng trong
các trường hợp điều trị xâm lấn nhỏ ở mặt,
cổ và tay. Trong những trường hợp này, bệnh
nhân thường trải qua quá trình thu hoạch
một lượng nhỏ chất béo, với mục đích tiêm
15-20 cc chất béo. Một số phương pháp hiệu
quả thấp yêu cầu thu hoạch 100 cc chất béo
trở lên để thu được 20 cc chất béo đã qua
xử lý. 80 cc còn lại bị mất trong quá trình xử
lý. Ở một số bệnh nhân, việc thu hoạch 100
cc là rất đơn giản, nhưng ở nhiều bệnh nhân
khác thì khó hơn, và có thể cần một thời gian
dài và thu hoạch từ một số khu vực hiến tặng
khác nhau.
Kỹ thuật
Thu hoạch
Kích
thước
của
ống
thu
hoạch
Kích
thước
của
các hạt
chất
béo
Số
lượng
thành
phần
mô
đệm và
mạch
máu
Kiểm
soát
áp
suất
âm
Bảo
quản tế
bào mỡ
nguyên
vẹn trong
quá
trình thu
hoạch
Telfa
rolling
Ống tiêm Coleman, ống tiêm
10 cc
5
4
4
1
1
a
f
m
q
Coleman
Ống tiêm Coleman, ống tiêm
10 cc
5
4
4
1
1
a
f
m
q
Lipogems
Ống tiêm đặc biệt 13G, ống
tiêm VacLok
3
3
3
1
1
b
g
n
Coleman
Ống tiêm Coleman, ống tiêm
10 cc, ống tiêm 22G
5
4
4
1
a
f
m
q
Puregraft
Ống thu hoạch Coleman, ống
tiêm 10 cc để thu hoạch
5
4
4
1
1
Regenlab
Regenlab cannula
a
f
m
q
5
1
1
5
1
aaa
lll
ppp
S
Lắng với
áp suất
hút thấp
Một ống thông có đầu tròn 3
mm với một cổng hút hình elip
duy nhất ở bên cạnh gần đầu
xa của nó (cổng đường kính: 3
× 9 mm
4
4
4
1
3
Ống tiêm 10 cc để hút
c
m
h
q
9.5.1 Thu hoạch
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
101
Định giá của phương pháp theo các khía
cạnh: (1, tối ưu, 2 rất tốt, 3 tốt, 4 đủ, 5 không
đủ)
Kích thước của ống cannula thu hoạch
Kích thước lớn của ống cannula thu hoạch
có liên quan đến vết sẹo lớn hơn ở điểm chèn
và thường gây đau và phù nề nghiêm trọng
hơn ở vị trí hiến tặng
Ghi chú
a: Cannula Coleman có đường kính tương
đối lớn, tạo ra nhiều sẹo hơn ở các điểm chèn.
Các cổng ở đầu ống cannula làm tăng nguy
cơ tổn thương mạch máu
b: 13 Gauge Cannula của Lipogem là một
ống cannula khá lớn với nhiều cổng
c: một ống cannula có đầu tròn 3 mm với
một cổng hút hình elip duy nhất ở phía gần
đầu xa của nó (đường kính cổng: 3 × 9 mm)
là một ống cannula khá lớn. Áp lực và lực cao
cần thiết để thu hoạch chất béo tạo ra nhiều
tổn thương cho các tế bào mỡ
d: Ống cannula 3,5 mm được sử dụng cho
hệ thống này là một ống cannula khá lớn
e: Goisis microcannula làm giảm tỷ lệ
chấn thương của bệnh nhân, cảm giác khó
chịu, các bất thường về da và giảm thiểu nguy
cơ tổn thương mạch máu do nhiều cổng giảm
kích thước. Bởi vì việc tiêm yêu cầu ít lực hơn
và chính xác hơn, ống microcannula có khả
năng điều khiển bằng tay vượt trội
aaa: trong quá trình thu hoạch, do ống
cannula bị bám vào nên độ hút chân không
kém. Nguy cơ nhiễm trùng cao và thời gian
thu hoạch kéo dài
Kích thước của các hạt chất béo
Các hạt chất béo được định nghĩa là
những hạt cầu nguyên vẹn của tế bào mỡ liên
kết với nhau bằng mô trung mô. Khi đường
kính của các hạt mỡ trở nên lớn hơn, vùng
hoại tử trung tâm sẽ mở rộng theo các giới
hạn sự khuếch tán
f: Coleman Cannula có các cổng hút lớn.
Do đó, kích thước của các hạt chất béo là khá
lớn
g: Lipogem Cannula có cổng hút có kích
thước trung bình. Do đó, kích thước của các
hạt chất béo là trung bình
h: một ống cannila có đầu tròn 3 mm với
một cổng hút hình elip duy nhất ở phía gần
đầu xa của nó có cổng lớn (đường kính cổng:
3 × 9 mm). Do đó, kích thước của các hạt
chất béo là khá lớn
i: Gentile Cannula có cổng hút có kích
thước trung bình. Do đó, kích thước của các
hạt chất béo là trung bình
l: Goisis cannula có cổng hút nhỏ. Do đó,
kích thước của các hạt chất béo nhỏ
Lắng với
áp suất
chiều cao
Một ống thông có đầu tròn 3
mm với một cổng hút hình elip
duy nhất ở bên cạnh gần đầu
xa của nó (cổng đường kính: 3
× 9 mm
4
4
5
5
5
Thoát hơi nước ở áp suất cao
(-760 mmHg)
m, o
r
R
c
h
Prl
Ống thông 3,5 mm, lỗ lớn, ống
tiêm VacLok
5
4
4
1
3
d
i
m
s
Mảnh
ghép da
Goisis
Ống Cannula Goisis 2,1 mm
với ống tiêm VacLok
1
1
1
1
1
e
L
p
s
Bộ Goisis
microfat
Ống Cannula Goisis 2,1 mm
với ống tiêm 10 cc
1
1
1
1
1
e
L
p
q
Chương 9
So sánh các kỹ thuật khác nhau của cấy ghép mỡ
102
lll: Ống thông Regenlab có cổng hút nhỏ.
Do đó, kích thước của các hạt chất béo nhỏ
Số lượng các thành phần mô đệm và
mạch máu
Kích thước nhỏ của ống cannula mang lại
lợi thế trong việc giảm thu hoạch chất béo có
tổ chức tốt, chủ yếu bao gồm các tế bào mỡ
trưởng thành và cải thiện việc thu thập nhiều
lớp mô mỡ bề ngoài hơn, có liên quan đến tỷ
lệ ADSC cao hơn
m: kích thước lớn của cannula làm tăng
thu hoạch chất béo có tổ chức tốt, chủ yếu
bao gồm các tế bào mỡ trưởng thành và làm
giảm sự tập trung của nhiều lớp mô mỡ bề
ngoài hơn, có liên quan đến tỷ lệ ADSC cao
hơn
n: kích thước trung bình của cannula làm
tăng thu hoạch chất béo có tổ chức tốt, chủ
yếu bao gồm các tế bào mỡ trưởng thành, và
giảm tập hợp nhiều lớp mô mỡ nông hơn, có
liên quan đến tỷ lệ ADSC cao hơn
o: mức áp suất âm cao phá hủy tế bào
gốc
p: Kích thước giảm của ống cannula
Goisis làm giảm việc thu hoạch chất béo có
tổ chức tốt, chủ yếu bao gồm các tế bào mỡ
trưởng thành và cải thiện việc thu thập nhiều
lớp mô mỡ bề ngoài hơn, có liên quan đến tỷ
lệ ADSC cao hơn
Kiểm soát áp suất âm
Mức áp suất âm cao phá vỡ các tế bào
mỡ
q: việc sử dụng ống tiêm 10 cc tránh được
áp suất âm dư thừa r: mức áp suất âm cao
phá vỡ các tế bào mỡ
s: việc sử dụng ống tiêm VackLok duy trì
kiểm soát tốt áp suất âm
Bảo quản tế bào mỡ trong quá trình thu
hoạch chất béo
Việc lựa chọn ống cannula và dụng cụ hút
có thể bảo tồn tế bào mỡ
r: mức áp suất âm cao phá vỡ các tế bào
mỡ
t: thu hoạch chất béo bằng ống cannula
có đầu tròn 3 mm với một hình elip duy nhất
cần phải tác động một lực lớn với sự phá vỡ
các tế bào mỡ
u: Do việc đưa ống cannula vào với chuyển
động quay cần ít lực hơn nên việc bảo tồn
các tế bào mỡ được cải thiện
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
103
9.5.2 Xử lý
Kỹ thuật
Xử lý
Sự hiện
diện của
chất
gây ô
nhiễm:
tế bào
máu
Sự hiện
diện
của
chất
gây ô
nhiễm:
dầu
Có
gây
mê
không
Sự
hiện
diện
của
dung
dịch
rửa
Nguy
cơ
nhiễm
trùng
Tiếp
xúc
với
không
khí
Nồng
độ
ADSC
Bảo
quản tế
bào mỡ
nguyên
vẹn
trong
quá
trình
chế
biến
Telfa
rolling
Telfa
rolling
1
1
1
1
5
5
2
1
a1
f1
o1
u1
x1
x1
A2
f2
Coleman
ly tâm
2
3
1
0
5
5
4
4
b1
g1
p1
u1
k1
k1
b2
g2
Lipogems
Hoạt
động của
các vi
cầu đã
tạo nhũ
tương
mô mỡ
1
1
4
2
2
1
5
n1
q1
v1
w1
c2
h2
Coleman
Ly tâm
2
2
2
0
5
5
4
4
b1
f1
p1
u1
k1
k1
b2
g2
Puregraft
Rửa và
lọc
2
1
1
3
2
2
1
2
Regenlab
Rửa
d1
h1
q1
z1
w1
w1
c2
I2
3
5
1
2
5
5
1
5
Gạn với
áp lực
thấp
Lắng cặn
4
5
4
0
3
2
2
1
c1
r1
L2
L1
u1
w1
w1
e2
Gạn với
áp lực
cao
Lắng cặn
4
5
4
0
3
2
2
1
r1
u1
w1
w1
e2
L2
c1
L1
Prl
Lọc
5
5
5
0
2
2
1
2
M1
t1
u1
w1
w1
d2
I2
Mảnh
ghép da
Goisis
Rửa và
lọc
1
1
1
3
1
1
1
1
d1
h1
q1
z1
y1
y1
c2
M2
Goisis
Microfat
Rửa và
lọc
1
1
1
3
1
1
1
1
d1
h1
q1
z1
y1
y1
c2
1
Chương 9
So sánh các kỹ thuật khác nhau của cấy ghép mỡ
104
Sự hiện diện của chất gây ô nhiễm: tế bào
máu
Sau khi được ghép, các tế bào máu thoát
mạch sẽ bị loại bỏ bởi một quá trình viêm có
thể dẫn đến tổn thương bàng hệ và mất thể
tích mảnh ghép
a1: Lăn Telfa loại bỏ khoảng 80–90% tế
bào hồng cầu và bạch cầu
b1: ly tâm loại bỏ khoảng 60–80% tế bào
hồng cầu và bạch cầu
c1: lắng trọng lực loại bỏ khoảng 50-60%
tế bào hồng cầu và bạch cầu
d1: rửa bằng lọc loại bỏ hơn 95% tế bào
hồng cầu và bạch cầu
e1: không loại bỏ các tế bào máu được
thực hiện
Sự hiện diện của chất gây ô nhiễm: dầu
Các lipid tự do ngoại bào được giải phóng
từ các tế bào mỡ bị vỡ. Vật liệu này được quét
bởi các tế bào mô và nó có thể gây ra phản
ứng viêm. Nang lipid có thể được tạo ra bởi
các tế bào viêm trong phản ứng của vật lạ
f1: Lăn Telfa loại bỏ hoàn toàn dầu
g1: ly tâm cộng với Telfa loại bỏ khoảng
90% dầu
h1: lưu giữ dầu giảm xuống dưới 1% trong
các mảnh ghép được chuẩn bị bằng cách rửa
bằng lọc
L1: lắng trọng lực không loại bỏ dầu
M1: Kỹ thuật prl không loại bỏ dầu
n1: Lipogems có liên quan đến việc loại
bỏ hoàn toàn dầu
Sự hiện diện của gây tê tại chỗ
o1: Kỹ thuật lăn tefa rất hiệu quả trong
việc loại bỏ chất lỏng khỏi mỡ hút
p1: ly tâm làm ngưng tụ mô, do đó làm
giảm hàm lượng chất lỏng trong nước, với
việc loại bỏ hiệu quả gây tê cục bộ
q1: quy trình rửa loại bỏ hoàn toàn thuốc
tê tại chỗ, được thay thế bằng dung dịch rửa
r1: mảnh ghép được xử lý bằng phương
pháp lắng trọng lực có hàm lượng chất gây
tê cao hơn so với ly tâm
t1: thuốc tê hoàn toàn còn lại trong dung
dịch
Sự hiện diện của dung dịch rửa
Nước trộn với chất béo tạo ra thể tích giả
sẽ biến mất ngay sau khi ghép
u1: không rửa được thực hiện trong quá
trình xử lý, do đó không có sự hiện diện của
giải pháp rửa
v1: tỷ lệ cao của dung dịch rửa
z1: tỷ lệ phần trăm trung bình của dung
dịch rửa
Sự hiện diện của vi khuẩn, nguy cơ nhiễm
trùng
x1: hệ thống hoàn toàn mở
k1: hệ thống mở một phần: ống tiêm mở
trong quá trình ly tâm
w1: hệ thống đóng trong quá trình xử lý
y1: nó là một hệ thống hoàn toàn khép
kín. Việc thu hoạch, xử lý và tiêm chất béo
được thực hiện vào hệ thống, giảm nguy cơ
nhiễm trùng
Tiếp xúc với không khí
Tiếp xúc trực tiếp với không khí có ảnh
hưởng tiêu cực đến tế bào mỡ, vì kích hoạt
các thành phần tiền viêm và tổn thương oxy
hóa
x1: hệ thống hoàn toàn mở
k1: hệ thống mở một phần: ống tiêm mở
trong quá trình ly tâm
w1: hệ thống đóng trong quá trình xử lý
y1: nó là một hệ thống hoàn toàn khép
kín. Việc thu hoạch, chế biến và tiêm chất
béo được thực hiện vào hệ thống, giảm nguy
cơ nhiễm trùng
Nồng độ tế bào gốc mỡ (ASCs)
Việc duy trì nồng độ cao nhất của tế bào
gốc mô mỡ (ASCs) được chứng minh để cải
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
105
thiện khả năng giữ lại chất béo A2: Telfa lăn
duy trì tính toàn vẹn và số lượng ADSC
b2: số lượng lớn nhất ASC tập trung ở đáy
ống tiêm bởi lực ly tâm và được loại bỏ
c2: tế bào gốc được bảo quản bằng cách
rửa và lọc
d2: tế bào gốc được bảo quản và cô đặc
bằng cách lọc
e2: một phần trăm ADSC bị nới lỏng với
thành phần chất lỏng trong quá trình gạn
Tính toàn vẹn và khả năng tồn tại của các
tế bào mỡ sau khi xử lý
Ghép có số lượng tế bào mỡ nguyên vẹn
lớn nhất sẽ có cơ hội bền lâu dài nhất
f2: Lăn Telfa duy trì tính toàn vẹn và số
lượng tế bào mỡ
g2: ly tâm phá hủy một số lượng lớn các
tế bào có nhân nguyên vẹn
h2: Hệ thống lipogem bao gồm sự phá vỡ
hoạt động của một số lượng lớn các tế bào
có nhân nguyên vẹn I2: áp lực lên túi có thể
phá hủy tế bào mỡ
L2: Gạn duy trì tính toàn vẹn và số lượng
tế bào mỡ
M2: van kiểm tra an toàn bảo vệ tế bào
mỡ khỏi áp suất dương dư thừa Goisis [2]
9.5.3 Tiêm chích
Tiêm
Tiêm
Bảo quản tế bào
mỡ trong khi tiêm
Thoải mái khi
tiêm
Telfa rolling
22 gauge cannula
5
2
n2
q2
Coleman
Lọc Coleman với 17
gauge cannula
1
5
o2
q2
Lipogems
25 gauge cannula
1
1
p2
r2
Coleman
22 gauge cannula
5
2
n2
s2
Puregraft
22 gauge cannula
5
2
Regenlab
n2
s2
2
1
Gạn với áp suất thấp
Lọc Coleman với 17
gauge cannula
1
5
o2
q2
Gạn với áp suất chiều
cao
Lọc Coleman với 17
gauge cannula
1
5
o2
q2
prl
17 gauge Coleman
cannula
1
5
o2
q2
Goisis dermal graft
22 gauge cannula
1
2
p2
s2
Goisis microfat
22 gauge cannula
1
2
p2
s2
Chương 9
So sánh các kỹ thuật khác nhau của cấy ghép mỡ
106
Bảo quản tế bào mỡ trong khi tiêm
n2: kích thước lớn của các hạt chất béo
sau khi chế biến, ống cannula nhỏ để tiêm
o2: kích thước lớn của các hạt chất béo
sau khi chế biến, ống cannula lớn để tiêm
p2: kích thước nhỏ của các hạt chất béo
sau khi chế biến, ống cannula nhỏ để tiêm
Thoải mái khi tiêm
q2: việc sử dụng ống cannula lớn để tiêm
làm giảm sự thoải mái
r2: việc sử dụng ống cannula rất nhỏ làm
tăng sự thoải mái và độ chính xác của việc
tiêm
s2: việc sử dụng các ống cannula nhỏ
làm tăng sự thoải mái và độ chính xác của
việc tiêm
9.5.4 Hiệu quả
Kỹ thuật: hiệu quả
Hiệu quả: tốn thời
gian
Hiệu quả: tiêu hao
chất béo
Hiệu quả: chi phí về
phòng phẫu thuật và
nhân viên
Telfa rolling
5
5
2
t2
a3
f3
Coleman
4
4
5
u2
b3
g3
Lipogems
4
4
5
v2
c3
g3
Coleman
4
4
5
u2
b3
g3
Puregraft
3
4
2
Regenlab
z2
c3
f3
5
5
2
zzz2
ccc3
f3
Gạn với áp suất thấp
2
1
2
w2
d3
f3
Gạn với áp suất
chiều cao
2
1
2
w2
d3
f3
Prl
3
4
2
x2
c3
f3
Ghép da Goisis
1
2
1
k2
e3
h3
Goisis microfat
1
2
1
h3
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
107
Hiệu quả: tốn thời gian
t2: Thủ tục Telfa rất lâu và tốn nhiều công
sức
u2: Quy trình Coleman đòi hỏi nhiều bước,
với thời gian chuyển và ly tâm
v2: Quy trình Lipogem đòi hỏi một thời
gian khá dài để thiết lập hệ thống và để rửa
nhiều chất béo
z2: mặc dù tương đối đơn giản, xử lý
thuần túy đòi hỏi các bước khác nhau
zzz2: thủ tục rất phức tạp, trong trường
hợp có sai sót, nó phải được lặp lại
w2: gạn là một trong những hệ thống xử
lý nhanh hơn
x2: quy trình PRL bao gồm các bước
khác nhau và các túi khác nhau, với nhiều lần
chuyển từ ống tiêm sang ống tiêm
k2: Hệ thống Goisis là hệ thống nhanh
hơn vì nó là một quy trình hoàn toàn khép kín.
Thời gian từ khi tiêm thuốc tê đến khi tiêm
mỡ là 25 phút
Hiệu quả: mất chất béo trong quá trình
chuẩn bị
a3: 70%
b3: 40%
c3: 30–40%
ccc3: 80–90%
d3: 10%
e3: 15%
Hiệu quả: chi phí về phòng phẫu thuật và
nhân viên
f3: phòng phẫu thuật nhỏ, 2 người
g3: phòng phẫu thuật lớn, 3 người
h3: phòng phẫu thuật nhỏ, 1 người
Tham khảo thêm
1. Peer LA. Cell survival theory versus
replacement
theory.
Plast
Reconstr
Surg.
1955;16:161–8.
2. Shiffman MA, Mirrafati S. Fat transfer
techniques: the effect of harvest and transfer
methods on adipocyte via- bility and review of the
literature. Dermatol Surg. 2001;27:819–26.
3. Cheriyan T, Kao HK, Qiao X, Guo L. The
effect of harvest pressure on adipose survival.
Plast Reconstr Surg. 2014;133(6):1365–8.
4. Nguyen P, Desouches C, Gay A, Hautier A,
Magalon G. Development of micro-injection as
an innovative autolo- gous fat graft technique:
the use of adipose tissue as dermal filler. J Plast
Reconstr Aesthet Surg. 2012;65:1692–9.
5. Boschert MT, Beckert BW, Puckett CL,
Concannon MJ. Analysis of lipocyte viability after
liposuction. Plast Reconstr Surg. 2002;109:761–
5. discussion 766
6. Eto H, Kato H, Suga H, Aoi N, Doi K, Kuno
S, Yoshimura K. The fate of adipocytes after non-
vascularized fat grafting: evidence of early death
and replacement of adipocytes. Plast Reconstr
Surg. 2012;129:1081–92.
7. Kølle SF, Fischer-Nielsen A, Mathiasen
AB, et al. Enrichment of autologous fat grafts
with ex-vivo expanded adipose tissue- derived
stem cells for graft survival: a randomised place-
bo-controlled trial. Lancet. 2013;382:1113–20.
8. Farr ST, Trivisonno A. Differential fat har-
vesting. Plast Aesthet Res. 2014;1:103–7.
9. Kirkham JC, Lee JH, Medina MA 3rd, Mc-
Cormack MC, Randolph MA, Austen WG Jr. The
impact of liposuction cannula size on adi- pocyte
viability. Ann Plast Surg. 2012;69:479–81.
Chương 9
So sánh các kỹ thuật khác nhau của cấy ghép mỡ
108
109
Chương
10
e-bacsy.com
Mỡ và tế bào gốc
Mario Goisis, Ribó Planas, Muñoz del
Olmo, Sara Izzo, Andrea Sbarbati
và
Giamaica Conti
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
110
10.1 Vai trò của tế bào gốc
Tế bào gốc trung mô của người (hMSCs)
có đặc tính biệt hóa đa năng. Các tế bào này
có thể được lấy từ các khu vực khác nhau bao
gồm tủy xương (hBMSCs), tủy răng, máu dây
rốn, màng hoạt dịch, nhau thai, da, dây rốn,
cơ xương, thạch Wharton, sụn chêm, sữa mẹ,
sụn, dây chằng , và mô đệm (ASCs). Một số
lượng lớn các ứng dụng của hMSC đã được
mô tả trong tài liệu.
Ví dụ, hMSCs đã được sử dụng để sửa
chữa cơ tim ở những trái tim bị nhồi máu của
chuột [1, 2], để cải thiện sự tái tạo mảnh ghép
trong quá trình cấy ghép ở chuột mắc bệnh
tiểu đường [3], và để điều trị bệnh lý thần kinh
ruột liên quan đến viêm ruột [4].
MSCs được biết đến là có khả năng tái
tạo sụn khớp và được đề xuất để điều trị viêm
xương khớp (OA), một chứng rối loạn thoái
hóa khớp mãn tính đặc trưng bởi sự phá hủy
sụn khớp. Trên thực tế, hMSCs có thể điều
chỉnh phản ứng miễn dịch bằng tác dụng
ức chế miễn dịch và kháng viêm paracrine.
Tái tạo sụn khớp ở mô hình viêm khớp ở thỏ
sau khi tiêm nội khớp hMSCs xenogeneic đã
được mô tả [5–7].
Jo và cộng sự. đã đánh giá tính an toàn
và hiệu quả của việc tiêm nội khớp MSCs có
nguồn gốc từ mô mỡ tự thân (AD-MSCs) cho
viêm xương khớp đầu gối. Họ chỉ ra rằng tiêm
AD-MSC trong khớp vào khớp gối bị thoái hóa
khớp giúp cải thiện chức năng và giảm đau ở
khớp gối và sửa chữa các tổn thương ở sụn
của nó, bằng cách tái tạo sụn khớp giống
hyalin, mà không gây ra các tác dụng phụ [8].
Vai trò của ASC trong thẩm mỹ và y học
tái tạo.
Làm giàu ASC của mô ghép chất béo cải
thiện sự sống sót của
Mảnh ghép đáng kể.
Hiệu quả của ASC trong việc giảm tỷ lệ tái
hấp thu của mô mỡ đã được chứng minh bởi
Kolle và cộng sự vào năm 2013 trong một bài
báo khoa học quan trọng được xuất bản trên
Lancet [9].
Các tác giả đã báo cáo kết quả của một
thử nghiệm mù ba, có đối chứng với giả dược
được sử dụng để so sánh tỷ lệ sống sót của
mô ghép mỡ không làm giàu so với mô ghép
giàu chất béo với tế bào gốc có nguồn gốc từ
mô mỡ tự thân (ASCs).
Mười ba bệnh nhân khỏe mạnh đã trải
qua hai lần lấy mỡ cách nhau 14 ngày: một
để cách ly ASC và mở rộng ex-vivo bằng thao
tác tế bào và một để chuẩn bị ghép mỡ. Hai
mô mỡ tinh khiết (mỗi phần 30 mL) lấy từ lần
hút mỡ thứ hai đã được chuẩn bị trước cho
mỗi người tham gia. Một mảnh ghép đã được
làm giàu với ASC (20 × 10 (6) tế bào trên mỗi
mL chất béo) được mở rộng trong quá trình
thử nghiệm và một mảnh ghép khác không
làm giàu ASC. Ghép sau được sử dụng như
một đối chứng. Các mảnh ghép chất béo
được tiêm một cách dưới da như một liều
bolus theo trình tự ngẫu nhiên.
Các xét nghiệm MRI đo thể tích mô mỡ
được tiêm ngay sau khi tiêm và sau 121 ngày.
So với các mảnh ghép đối chứng, các
mảnh ghép được làm giàu ASC cho thấy
M. Goisis (*)
Phẫu thuật viên thẩm mỹ và hàm mặt, Bệnh viện Go Easy, Milan, Italy
R. Planas · M. del Olmo
Clínica Planas, Barcelona, Spain
S. Izzo
Department of Plastic Surgery, University of Campania “Luigi Vanvitelli”, Naples, Piazza Miraglia,
Naples, Italy
A. Sbarbati · G. Conti
Department of Neuroscience, Biomedicine and Movement, Human Anatomy and Histology Section,
University of Verona,Strada Le Grazie 8, Verona, Italy
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
111
khối lượng mô mỡ và mô liên kết mới được
tạo ra cao hơn. Mô liên kết mới được tạo ra
được coi là sản phẩm của ASC, vì loại mô
này thường không được phát hiện trong mô
mỡ dưới da. Những kết luận này phù hợp với
khả năng phân biệt của ASC, đặc biệt, ở dạng
giống như nguyên bào sợi của chúng [10].
Các mảnh ghép chất béo được làm giàu
ASC bảo toàn hơn 80% khối lượng bolus ban
đầu của chúng 4 tháng sau.
10.1.1 Hiệu quả làm trắng của
tế bào gốc có nguồn gốc từ mỡ
Hiệu quả của tế bào gốc có nguồn gốc
từ mỡ (ASC) trong việc giảm tổng hợp mela-
nin đã được chứng minh bằng thực nghiệm
trong ống nghiệm và in vivo trên các mô hình
động vật [11, 12].
Trên thực tế, ASC có tác dụng làm trắng
thông qua cơ chế paracrine. Đặc biệt, hoạt
động của tyrosinase, đóng một vai trò quan
trọng trong việc tổng hợp melanin, đã bị ức
chế bởi ASCs. Để làm rõ cơ chế hoạt động
làm trắng của ADSCs, mức độ biểu hiện của
các protein tạo hắc tố đã được đánh giá. Đặc
biệt, các biểu hiện của tyrosinase và TRP1 đã
được điều chỉnh giảm [13].
ASC là những chất tiêu hủy gốc tự do
và được ưu đãi với hoạt tính chống oxy hóa
Hình. 10.1 Hình ảnh một vòng tròn sậm màu
trước khi điều trị bằng nanofat (Được phép của
). (Được xuất bản dưới sự cho
phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được
bảo lưu)
Hình. 10.2 Cùng một bệnh nhân 6 tháng sau khi
tiêm nanofat (Được phép của ).
(Được xuất bản dưới sự cho phép của © Mario
Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
mạnh, có thể dẫn đến sự xâm nhập của quá
trình tổng hợp melanin [12].
Tuy nhiên, không chỉ hoạt động chống oxy
hóa mà còn tiết ra các cytokine cụ thể của
ASC có thể góp phần vào hiệu quả làm trắng.
TGF-b đóng vai trò ức chế sự hình thành sắc
tố, vì nó cản trở hoạt động của tyrosinase.
Một mức độ cao của yếu tố tăng trưởng
này đã được phát hiện trong ASC, có thể chịu
trách nhiệm cho việc ức chế tổng hợp mela-
nin bởi ADSC-CM [12].
Mặc dù cần có các nghiên cứu lâm sàng
sâu hơn, việc sử dụng ADSC và các yếu tố bài
tiết của chúng cho thấy khả năng ứng dụng
tuyệt vời trong các rối loạn da tăng sắc tố
(Hình 10.1 và 10.2).
10.1.2 Các tác động thúc đẩy
mọc tóc của ADSC
Một số báo cáo đã chứng minh rằng các
yếu tố tăng trưởng như PDGF, HGF, VEGF và
fibronectin kích thích sự phát triển của lông
ở các mô hình động vật và lâm sàng [12, 14].
Để xác định xem liệu những tác động nội
tiết này của ADSC có thể thúc đẩy sự phát
triển của tóc hay không, Won và cộng sự đã
nghiên cứu tác động của ADSC đối với tế bào
nhú da ở người được nuôi cấy (hDPCs). Điều
trị ADSC làm tăng đáng kể sự gia tăng hDPCs
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
112
lên đến 130% sau 48 giờ. Nghiên cứu động
vật trên chuột bạch đã xác nhận những kết
quả này [14]. Đặc biệt, về mặt mô học, da
lưng của những con chuột được điều trị bằng
ADSC-CM cho thấy số lượng nang lông tăng
lên. Nghiên cứu này chỉ ra rằng ADSCs thúc
đẩy sự phát triển của tóc bằng cách tăng sự
gia tăng của các DPC và kích hoạt giai đoạn
anagen của chu kỳ tóc (Hình.10.3).
Hình. 10.3 Tiêm ADSC sau khi tách bằng rung
(Được phép của ). (Được xuất
bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018.
Mọi quyền được bảo lưu)
Gần đây, có báo cáo rằng điều trị bằng
phương tiện điều trị ADSCs (ADSC-CM) có
hiệu quả đối với chứng rụng tóc kiểu phụ nữ
(FPHL). Một nghiên cứu hồi cứu, quan sát
về kết cục ở 27 bệnh nhân có FPHL và được
điều trị bằng ADSC-CM đã được thực hiện.
Các tác giả đã sử dụng các đầu kim nhỏ để
cho phép ASC-CM khắc sâu vào làn da của
con người. Để đánh giá hiệu quả của phương
pháp điều trị, hồ sơ bệnh án của bệnh nhân
và hình ảnh tam giác đã được phân tích. ASC-
CM cho thấy hiệu quả trong điều trị FPHL sau
12 tuần điều trị (Shin và cộng sự, 2015). Ví
dụ, độ dày của tóc và mật độ tóc tăng lên
đáng kể, và không có bệnh nhân nào báo cáo
phản ứng phụ [15].
Fukuoka và Suga cũng báo cáo tác dụng
của một sản phẩm thương mại có chứa dung
dịch protein của môi trường điều hòa tế bào
gốc có nguồn gốc từ mỡ trong việc phục hồi
tóc. Thuốc được tiêm trong da ở 22 bệnh
nhân bị rụng tóc [16]. Những bệnh nhân này
được điều trị 3-5 tuần một lần trong tổng số
sáu buổi, và tóc của họ đã tăng lên đáng kể ở
cả bệnh nhân nam và nữ.
10.2 Nguồn gốc của tế bào gốc
Về mặt lâm sàng, hai nguồn tế bào gốc
trung mô ở người (hMSCs) được khai thác
phổ biến nhất là tủy xương (hBMSCs) và chất
béo (hASCs).
De Ugarte và cộng sự. đã chứng minh
không có sự khác biệt đáng kể về năng suất
giữa các tế bào mô đệm, động học tăng
trưởng, sự già đi của tế bào, khả năng biệt
hóa đa dòng và hiệu quả truyền gen giữa
hBMSCs và hASCs.
Việc lấy tủy là một phương pháp điều trị
tương đối đau và xâm lấn. Và với sự già đi, số
lượng và nồng độ hMSC thu được bằng cách
hút tủy suy giảm.
Ngược lại, hMSC có thể được tìm thấy với
một lượng dồi dào trong chất béo. hASC giữ
được khả năng tồn tại tốt và tiềm năng khác
biệt ngay cả ở những bệnh nhân lớn tuổi, với
tỷ lệ lão hóa thấp hơn và khả năng tăng sinh
cao hơn [17, 18].
10.2.1 Tế bào gốc và tê tại chỗ
Người ta báo cáo rằng lidocaine có thể
có tác động tiêu cực đến ASC. Trên thực tế,
nồng độ từ 0,03% trở lên của lidocain có thể
gây độc cho tế bào gốc [19].
Goldman và cộng sự. đã tiến hành hút mỡ
dưới gây mê toàn thân trên một vùng dưới
ánh sáng tiêu chuẩn bằng lidocaine [20]. Ở
mặt đối diện, hút mỡ được thực hiện dưới vòi
phun không có lidocain. Năm ml mỡ hút ra
đã được xử lý để phân lập SVF. Các ASC kết
dính được đếm sau 24 giờ nuôi cấy.
Việc loại bỏ lidocain làm giảm đáng kể
quá trình chết của SVF và ASC trong khi hút
mỡ [20].
Vì lý do này, điều rất quan trọng là loại
bỏ lidocain hoặc các loại thuốc gây tê khác
được tiêm trong quá trình lấy mỡ. Rửa là một
quy trình hiệu quả để thực hiện điều này.
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
113
Đồng thời, tại thời điểm tiêm tế bào gốc,
chỉ nên sử dụng thuốc gây tê bên ngoài vùng
điều trị mong muốn và / hoặc sử dụng tê khối
thần kinh vùng để tránh sự tiếp xúc giữa tế
bào gốc và gây tê cục bộ [19, 21].
10.2.1.1
Tế bào gốc và thuốc
Gần đây, Bowen đã thực hiện một cuộc
đánh giá các loại thuốc dược phẩm và chất
bổ sung có thể có tác dụng bất lợi trong việc
chữa lành ASC. Đặc biệt, việc sử dụng các
loại thuốc chống viêm nonsteroid nên được
ngừng sử dụng ít nhất 5 ngày trước khi làm
thủ thuật vì tác động tiêu cực của chúng đối
với việc chữa lành.
Vì corticosteroid có tác động tiêu cực đến
quá trình hồi phục, nên trì hoãn thủ thuật ít
nhất 8 tuần sau khi tiêm steroid. Nếu có thể,
nên ngừng sử dụng steroid dạng hít trước khi
làm thủ thuật.
Một số cảnh báo đã được đưa ra liên
quan đến ảnh hưởng của chất ức chế men
khử
3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-coenzyme
A (HMG-CoA) (ví dụ: atorvastatin [Lipitor]) và
chất ức chế bơm proton (omeprazole) đối
với sự phát triển của tế bào gốc trong ống
nghiệm . Đặc biệt, chất ức chế HMG-CoA
reductase làm giảm hình thành tang sinh
mạch. Đối với những người đang hoặc đã sử
dụng chất ức chế HMG-CoA reductase, nên
cân nhắc việc bổ sung coenzyme Q-10 [22].
10.3 Các giao thức khác nhau
để phân lập tế bào gốc có nguồn
gốc từ mỡ (ASCs)
10.3.1 Enzym tiêu hóa
Hầu hết các quy trình cho phân lập tế bào
gốc có nguồn gốc từ mỡ sử dụng quá trình
phân hủy bằng enzym với collagenase và sau
đó phát triển trong môi trường có nguồn gốc
từ động vật (Bảng 10.1). Trong các giao thức
này, tế bào gốc phải chịu sự thao tác rộng rãi
(Hình 10.4). Thao tác mở rộng và nói chung,
mở rộng ex-vivo rất khó thực hiện do các yêu
cầu về tuân thủ “sản xuất tế bào” theo Hướng
dẫn Thực hành Sản xuất Tốt (cGMP) hiện
hành [23].
Hơn nữa, quá trình tiêu hóa bằng
enzym mất khoảng 3–27 giờ. Mặc dù vậy, nó
yêu cầu thuốc thử có nguồn gốc từ động vật
Bảng 10.1 Giao thức cách ly tiêu chuẩn
Cách ly tiêu chuẩn
Hút hết nước muối và dầu
Rửa 250 ml chất béo 3–5 lần, mỗi lần trong 5 phút trong nước muối đệm phosphat
(PBS), loại bỏ pha dưới cho đến khi trong
Thêm 0,075% collagenase trong PBS và ủ trên máy lắc ở 37 ° C trong 1 giờ
Thêm Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) chứa 10% huyết thanh (FBS) để trung
hòa collagenase
Ly tâm chất béo đã tiêu hóa trong các ống 50 ml ở 1200 × g trong 10 phút
Đặt lại các tấm trong dung dịch ly giải tế bào đỏ 160 mM (amoni clorua-NH4 CI) và ủ
trong 10 phút
Ly tâm ở 1.200 × g trong 10 phút
Rửa các tế bào 2 lần trong PBS
Đặt lại các tấm và đường ngang tế bào qua lưới nylon 100 μm
Thời lượng: khoảng 3–27 giờ. Vật liệu: máy ly tâm, máy lắc gia nhiệt, NH4CI, DMEM, FBS,
PBS, lưới nylon 100 μm
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
114
(collagenase). Collagenase dư có khả năng
độc hại và có liên quan đến nguy cơ mắc các
tác dụng phụ nghiêm trọng, chẳng hạn như
phản ứng dị ứng, mà cũng có thể gây loét da,
chấn thương dây thần kinh và tổn thương gân
hoặc dây chằng [23].
Hơn nữa, phân hủy bằng enzym là một
quy trình rất tốn kém. Collagenase có giá
khoảng $ 20 hoặc khoảng € 18 cho mỗi 100
g tiêu hóa mô mỡ, trong khi các yếu tố khác
liên quan (huyết thanh, Dulbecco’s Modified
Eagle Medium và nước muối đệm phosphat)
có giá khoảng $ 15 hoặc € 13 cho mỗi quy
trình [23].
10.3.2 Cách ly cơ học bằng máy lắc rung
Raposio và cộng sự. đã trình bày một
chiến lược mới và hiệu quả để cô lập các
tế bào gốc có nguồn gốc từ mỡ từ việc thu
hoạch mỡ thông thường [23].
Toàn bộ quy trình mất khoảng 15 phút;
không sử dụng colagen, huyết thanh hoặc
thuốc thử có nguồn gốc từ động vật.
Đặc biệt, phòng mổ hoặc phòng phẫu
thuật được trang bị máy lắc rung và máy
ly tâm, cả hai đều được đặt trên một băng
luồng khí nhiều lớp. Quy trình phân lập được
thực hiện từng bước dưới tủ thổi khí tầng, do
đó giảm thiểu rủi ro nhiễm bẩn.
Trong nghiên cứu của Raposio và cộng
sự, mô mỡ được thu hoạch bằng các quy
trình hút mỡ tiêu chuẩn bằng cách sử dụng
các ống cannula có đầu tù thông thường
được gắn vào ống tiêm LuerLok 10 ml. Thành
phần của mỗi ống tiêm, khoảng 10 mL, được
chuyển đến phía dưới băng luồng khí thành
các ống nghiệm bằng nhựa 10 ml. Sau đó,
các ống này được đặt trong máy lắc rung
ở tốc độ 6.000 vòng / phút trong 6 phút và
ngay sau đó, được quay ly tâm ở tốc độ 1.600
vòng / phút trong 6 phút. Sau đó, trong cùng
một băng luồng khí, tầng ở dưới cùng của
mỗi ống được thu thập bằng hệ thống pipet
tự động và được đổ vào ống tiêm LuerLok 10
ml.
Raposio và cộng sự. đã chứng minh rằng
quy trình này dẫn đến một quần thể tế bào
gốc dồi dào hơn 12% so với quy trình được
phân lập bằng cách sử dụng quy trình enzym
tiêu chuẩn.
Nó không yêu cầu mở rộng hoặc thao tác
tế bào gốc, và do đó, nó không phải tuân theo
Hình. 10.4 Giao thức phân lập
tiêu chuẩn. (Được xuất bản dưới
sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Máy ly tâm
1200 xg 10
phút
Hút chất nổi
phía trên
Đĩa SVF
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
115
các hạn chế quy định do Nguyên tắc cGMP
áp đặt.
10.3.3 Bộ Microfat SVF: Phân lập cơ học
trong hệ thống kín
Năm 2016 (hội nghị FACE, London), Goi-
sis và cộng sự trình bày nguyên mẫu của một
bộ công cụ mới để cô lập các tế bào gốc có
nguồn gốc từ mỡ.
Không sử dụng collagenase, huyết thanh
hoặc thuốc thử có nguồn gốc từ động vật.
Vì kit SVF microfat không yêu cầu mở rộng
hoặc thao tác tế bào gốc, do đó, nó không
phải tuân theo các hạn chế quy định do
Hướng dẫn cGMP áp đặt.
Ống cannula được sử dụng để thu hoạch
chất béo được gọi là ống cannula Goisis.
Trên cơ sở các kết quả tương tự thu được
bằng cách sử dụng các cannula nhỏ, chất
béo được thu hoạch bằng cách sử dụng
cannula Goisis có tỷ lệ thành phần mô đệm
và mạch máu cao hơn (dẫn đến cải thiện
năng suất của ADSC cô lập).
Đặc biệt, các xét nghiệm mô học được
thực hiện trên 247 mẫu đã chứng minh rằng
các tế bào mỡ được thu hoạch bằng cách sử
dụng cannula Goisis có liên quan đến tỷ lệ
phần trăm cao của các thành phần mô đệm
và mạch máu khi so sánh với chất béo được
thu hoạch bằng cách sử dụng công nghệ
cannula một cổng. [24].
Phòng điều trị được trang bị máy rung và
máy ly tâm, cả hai đều được đặt gần bệnh
Hình. 10.5 Máy lắc rung được đặt trên bàn mổ. (Được xuất bản dưới sự cho phép
của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
116
Hình. 10.6 (a, b) Máy lắc được bao phủ bởi một
tấm màn drape dính kép (Deltamed, Ý
fat.com). Một mặt của tấm màn được gắn vào mặt
phẳng rung. (Được xuất bản dưới sự cho phép của
© Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.7 (a, b) Mặt trên của tấm drape được gắn
vào bộ microfat (). (Được xuất
bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018.
Mọi quyền được bảo lưu)
a
b
a
b
nhân. Quy trình cách ly được thực hiện hoàn
toàn trong một hệ thống khép kín, do đó giảm
thiểu rủi ro ô nhiễm (Hình. 10.5, 10.6a, b,
10.7a, b, 10.8, 10.9, 10.10, 10.11a, b,
10.12a, b, 10.13a, b, 10.14, 10.15, 10.16a, b,
10.17, 10.18, 10.19, 10.20a, b, 10.21, 10.22,
10.23, và 10.24).
Trong một nghiên cứu được trình
bày bởi Goisis và cộng sự Imcas 2019
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
117
Hình. 10.8 Gây tê tại chỗ bằng cách sử dụng bộ Microfat.
(Được xuất bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018.
Mọi quyền được bảo lưu)
a
b
Hình. 10.11 (a, b) Quá trình lọc loại bỏ các tế bào
máu và dung dịch Klein khỏi ống tiêm. (Được xuất
bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018.
Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.9 Thu hoạch 20 cc chất béo bằng cách
sử dụng ống cannula Goisis. (Được xuất bản dưới
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu)
Hình. 10.10 Chất béo được chuyển theo kiểu khép
kín vào bộ. (Được xuất bản dưới sự cho phép của
© Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
118
Hình. 10.12 (a, b) Vì chất béo và SVF không thể đi
qua ống lọc, nên áp suất trong ống tiêm A tăng lên.
Ở áp suất 1,5 m nước, các van một chiều trong hệ
thống sẽ tự động mở. Bằng cách này, không cần
mở nút, thành phần của ống tiêm A được tự động
chuyển vào ống tiêm C (xem mũi tên màu vàng).
(Được xuất bản dưới sự cho phép của © Mario
Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.13 (a, b) Rung sau đó được áp dụng trong
6 phút với tốc độ 6000 dao động / phút. (Được
xuất bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
a
a
b
b
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
119
Hình. 10.14 Tách phần chất béo và chất lỏng trước (hình bên trái)
và sau khi rung (hình bên phải). (Được xuất bản dưới sự cho phép
của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.15 Ống tiêm rỗng, A, được lấy ra. (Được
xuất bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
120
Hình. 10.16 (a, b) Vị trí của ống tiêm C được thay
đổi. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.17 Bằng van một chiều, hàm lượng thấp
hơn của ống tiêm C chỉ được chuyển vào ống tiêm
F. Ống tiêm này chứa SVF, tế bào gốc và dung dịch
nước muối. (Được xuất bản dưới sự cho phép của
© Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.18 Van stopcock của ống tiêm E được
mở. Bằng cách này, ống tiêm E được kết nối với
ống và hệ thống. Qua van một chiều, thành phần
của ống tiêm F chỉ được chuyển vào ống tiêm E.
(Được xuất bản dưới sự cho phép của © Mario
Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.19 SVF và tế bào gốc được tiêm vào vùng
nhận. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
(Goisis và cộng sự so sánh các giao
thức,
IMCAS
2019)
vai
trò
của
bộ
Microfat SVF Kit và khả năng tồn tại của tế
bào gốc đã được thảo luận. Số lượng tế bào
gốc của 2 mẫu khác nhau được đo ở 72 giờ,
7 ngày và 14 ngày sau khi thu mẫu. Mẫu
đầu tiên là microfat được thu hoạch bằng
Goisis Cannula và được xử lý bằng Hệ thống
Goisis, với giá trị tế bào gốc cao (5600, 6300,
6500). Mẫu thứ hai là siêu lọc, với mức độ tế
bào gốc khá đáng kể (2478, 3500 và 3900).
một số hình ảnh của tế bào gốc được báo
a
b
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
121
Hình. 10.20 (a, b) Một lựa chọn thay thế là sử
dụng SVF và tế bào gốc để làm giàu chất béo.
Trong trường hợp này, vị trí của ống tiêm F được
thay đổi. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.21 Một ống tiêm chứa đầy microfat (ống
tiêm G) được kết nối với hệ thống. Nhờ van một
chiều, thành phần của ống tiêm F chỉ được chuyển
vào ống tiêm G. Đặc biệt, ống tiêm F chứa SVF, tế
bào gốc và dung dịch nước muối. (Được xuất bản
dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
Hình. 10.22 Van stopcock của ống tiêm E được
mở. Bằng cách này, ống tiêm E được kết nối với
ống và hệ thống. Nhờ van một chiều, chất béo giàu
tế bào gốc chỉ được chuyển vào ống tiêm E. (Được
xuất bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
cáo trong hình ảnh 10.23a, 10.23b, 10.23c
và 10.23d Kính hiển vi ánh sáng của ADSc
nuôi cấy sau khi Goisis xử lý mỡ hút ra. Trung
mô tế bào gốc được đặc trưng bởi nhiều tế
bào chất và nhân trung tâm. Sau bảy ngày
tế bào nuôi cấy khá hợp lưu trong bình nuôi
cấy. 10.23b Quét bản sao hiển vi điện tử của
tế bào gốc trung mô được nuôi cấy trong bảy
ngày. Bảng điều khiển Độ phóng đại thấp
hơn chứng tỏ tình trạng hợp lưu của các tế
bào. Bảng B cho thấy sự phóng đại của các
a
b
tế bào và các nhánh tế bào chất rất dài nhô
ra khỏi tế bào. 10.23c Kính hiển vi lên tế bào
gốc trung mô biểu hiện-đồng thời các điểm
đánh dấu SEEA3 và CD105. Sự biểu hiện của
hai điểm đánh dấu này cho phép xác định
một quần thể nhỏ các tế bào gốc trung mô
được đặc trưng bởi đa năng và có khả năng
biệt hóa trong các tế bào trưởng thành khác
nhau. bảng A hiển thị dân số phụ ở một bệnh
nhân 35 tuổi, trong khi bảng B hiển thị dân
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
122
Hình. 10.23 (a) Soi kính hiển vi ADSc nuôi cấy sau
khi xử lý Goisis mỡ hút ra. Tế bào gốc trung mô
được đặc trưng bởi tế bào chất bên ngoài và nhân
trung tâm. Sau 7 ngày tế bào nuôi cấy khá hợp lưu
trong bình nuôi cấy. (b) Kính hiển vi điện tử quét
tế bào gốc trung mô được nuôi cấy trong 7 ngày.
Bảng điều khiển Độ phóng đại thấp hơn chứng
tỏ tình trạng hợp lưu của các ô. Bảng B cho thấy
sự phóng đại của các tế bào và các nhánh tế bào
chất rất dài nhô ra khỏi tế bào. (c) Kính hiển vi
lên các tế bào gốc trung mô biểu hiện đồng thời
các dấu ấn SEEA3 và CD105. Sự biểu hiện của hai
dấu hiệu này cho phép xác định một quần thể con
của các tế bào gốc trung mô được đặc trưng bởi
tính đa năng và có thể biệt hóa trong các tế bào
trưởng thành khác nhau. Bảng A cho thấy dân số
phụ ở một bệnh nhân 35 tuổi, trong khi bảng B
cho thấy dân số phục của bệnh nhân 28 tuổi. Ở
người trẻ hơn, sự biểu hiện của hai dấu hiệu, vì
vậy dân số đa năng cao hơn ở bệnh nhân lớn tuổi.
(d) Dẫn truyền adipogenic của tế bào gốc trung
mô đa năng. Những tế bào này có khả năng biệt
hóa trong các loại tế bào trưởng thành khác nhau,
nhưng chúng có khả năng biệt hóa thành tế bào
mỡ trưởng thành trong thời gian ngắn hơn so với
tế bào gốc đa năng.
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
123
số phụ của một bệnh nhân 28 tuổi. Ở người
trẻ hơn, sự biểu hiện của hai dấu hiệu, vì vậy
dân số đa năng cao hơn ở bệnh nhân lớn tuổi.
23d Dẫn truyền adipogenic của tế bào gốc
trung mô đa năng. những tế bào này có khả
năng biệt hóa thành các loại tế bào trưởng
thành khác nhau, nhưng chúng có khả năng
biệt hóa thành tế bào mỡ trưởng thành trong
thời gian ngắn hơn so với tế bào gốc đa năng.
Hình. 10.23 Tiếp
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
124
Hình. 10.24 P.R.L. giao thức. (Được xuất bản dưới
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu)
Hình. 10.25 Hệ thống Fastkit. (Được xuất bản bởi
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu)
Hình. 10.26 (a, b) Hút mỡ được thực hiện bằng
ống cannula 3,5 mm. (Được xuất bản dưới sự cho
phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được
bảo lưu)
10.3.4 PRL® mỡ chuyển hóa Giàu
Tiểu cầu
Phương pháp PRL® (Platelet-Rich Lipo-
transfer) là kết quả của kinh nghiệm nhiều
năm trong việc sử dụng mô mỡ được làm
giàu bằng huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) và
phân đoạn mạch máu mô đệm (SVF) trong
các quy trình phẫu thuật khác nhau.
Hệ thống PRL bao gồm ba thiết bị:
•
Hệ thống tách Fastkit SVF để cách ly
SVF
•
Hệ thống C.Punt để chuẩn bị PRP
•
Hệ thống trộn
Fastkit là một phương pháp dựa trên việc
lọc chọn lọc SVF và tách bằng ly tâm (Hình.
10.25, 10.26a, b, 10.27a, b, 10.28, 10.29a, b,
và 10.30)
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
125
Hình. 10.27 (a, b) Lần lọc đầu tiên được thực hiện
bằng cách sử dụng đầu lọc 120 μ. (Được xuất bản
dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
Hình. 10.28 Ly tâm được áp dụng trong 10 phút.
(Được xuất bản dưới sự cho phép của © Mario
Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.29 (a, b) Quá trình
lọc thứ hai, bằng cách tách
SVF cơ học, được áp dụng.
(Được xuất bản dưới sự cho
phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo
lưu)
10.3.5 Lipogems
Hệ thống Lipogems (Lipogems Interna-
tional S.R.L., Milan, Ý) là một thiết bị không
có enzyme được sử dụng để thu được một
dẫn xuất mô mỡ được làm giàu cao trong
các phần tử giống pericyte.
Nó dựa trên một thiết bị dùng một lần
làm giảm dần kích thước của các cụm mô
mỡ (từ các cụm có đường kính 1–3,5 mm
đến các cụm 0,2–0,8 mm), đồng thời loại bỏ
dầu và tế bào đỏ. Toàn bộ quá trình xảy ra
trong một hệ thống ngâm hoàn toàn. Thiết bị
tiêu chuẩn 225 mL Lipogems cho phép xử lý
khoảng 100–130 mL mỡ hút ra để thu được
khoảng 60–100 mL sản phẩm cuối cùng.
Sản phẩm này là một dẫn xuất mô mỡ với
vẻ ngoài của một sản phẩm được thao tác
tối thiểu có thể được tiêm. Nó không yêu cầu
mở rộng hoặc thao tác trên tế bào gốc, và
do đó, nó không phải tuân theo các hạn chế
quy định của Hướng dẫn cGMP. Mô học của
sản phẩm có nguồn gốc từ lipogem cho thấy
mô mỡ bị phân mảnh và tổn thương mô mỡ
(Hình.10.31).
Tremolada và cộng sự. đã báo cáo phần
trăm cao hơn của pericytes trưởng thành và
hMSCs cao hơn đáng kể, và lượng yếu tố tạo
máu thấp hơn trong Lipogems, so với mỡ hút
ra chưa được xử lý.
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
126
Hình. 10.30 SVF, chất béo và PRP được trộn trong
một hệ thống kín. (Được xuất bản dưới sự cho
phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được
bảo lưu)
Hình. 10.31 Hình ảnh mô học của chất béo thu
được bằng cách sử dụng hệ thống Lipogems.
(Được xuất bản dưới sự cho phép của © Mario
Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Mặc dù vậy, Lipogems cần được phân
loại là một hệ thống thu hoạch, xử lý và tiêm
trở lại chất béo của con người. Trên thực tế,
Lipogems không thể phân lập tế bào gốc.
Sản phẩm cuối cùng (Lipogems) chứa các tế
bào mỡ trưởng thành trộn với các tế bào gốc
[1] (Hình. 10.32a–c).
10.3.6 Nanofat: Kỹ thuật Tonnard
Vào năm 2013 Tonnard và cộng sự xuất
bản một kỹ thuật sáng tạo. Chất béo thu
hoạch được nhũ hóa cơ học và lọc cho đến
khi thu được hỗn dịch lỏng. Tonnard gọi đây
là “chất béo nano - nanofat” [25].
Đặc biệt, quá trình nhũ hóa chất béo được
thực hiện bằng cách di chuyển chất béo giữa
hai ống tiêm 10 cc, được kết nối bởi một đầu
nối LuerLok. Sau 30 lần trôi qua, chất béo trở
nên lỏng và có dạng hơi trắng (Hình 10.33a,
b). Trên thực tế, chất béo đã bị phân mảnh và
biến đổi thành dạng nhũ tương. Sau khi nhũ
hóa, chất lỏng mỡ được lọc qua vải nylon vô
Hình. 10.32 (a, b) Hình minh họa của hệ thống
Lipogems (bằng sáng chế công khai). (Được xuất
bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018.
Mọi quyền được bảo lưu)
Phương pháp chuẩn bị
mô, đặc biệt là mô mỡ
EP 2574663 A1
trùng với kích thước lỗ 0,5 mm (Hình 10.34a
– c). Quá trình lọc được thực hiện để loại bỏ
tàn dư của mô liên kết có thể chặn các kim
nhỏ trong quá trình tiêm (Hình 10.35a, b và
10.36).
Đánh giá mô học và khả năng tồn tại cho
thấy chất béo nano đã làm mất cấu trúc bình
thường của mô mỡ. Nói chung, tế bào mỡ bị
phá hủy và thay thế bằng nhũ tương nhờn.
Tuy nhiên, việc phân lập và nuôi cấy đã chứng
minh rằng một số lượng lớn tế bào gốc trung
mô chất lượng tốt vẫn có trong các mẫu chất
béo nano.
Tonnard coi chất béo nano như một quy
trình kỹ sư hóa mô in vivo. Trên thực tế, tác
dụng chính của chất béo nano là hoạt động
của tế bào gốc.
Trong chất béo nano, phần mạch mô
đệm không được tinh chế mà được trộn với
dầu và phần tế bào mỡ chết. Tuy nhiên, theo
ý kiến của Tonnard, việc tách phần mạch mô
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
127
đệm khỏi chất béo nano trước khi tiêm sẽ
phức tạp, tốn thời gian và tốn kém. Hơn nữa,
người ta biết rằng các tế bào chết thu hút các
đại thực bào gây ra sự phát triển và đóng một
vai trò quan trọng trong việc tái tạo các mô bị
tổn thương. Vì lý do này, việc tiêm các tế bào
mỡ phân mảnh có thể đóng một vai trò trong
việc biệt hóa tế bào gốc và tái tạo mô (Hình.
10.37).
Hình. 10.34 (a–c) Sau khi nhũ hóa, chất lỏng béo
được lọc qua vải nylon vô trùng có kích thước lỗ
0,5 mm. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.33 (a, b) Quá trình nhũ hóa chất béo
được thực hiện bằng cách di chuyển chất béo giữa
hai ống tiêm 10 cc. (Được xuất bản dưới sự cho
phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được
bảo lưu)
10.3.7 Nanograft: Kỹ thuật Planas
Mục đích chính của kỹ thuật Planas nano-
fat là tránh tiếp xúc với không khí.
Vì lý do này, theo kinh nghiệm của mình,
Planas đã không dùng đến việc lọc chất
béo qua vải nylon như mô tả ban đầu của
Tonnard và cộng sự, trong nỗ lực duy trì toàn
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
128
Hình. 10.37 Với thiết bị này, chúng tôi có thể thực
hiện quá trình nhũ hóa chất béo, chuyển chất béo
30 lần từ ống tiêm này sang ống tiêm khác
Hình. 10.36 Nanofat được tiêm bằng cách sử
dụng một ống cannula 27-gauge. (Được xuất bản
dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
Hình. 10.35 (a, b) Quá trình lọc được thực hiện để
loại bỏ tàn dư mô liên kết có thể chặn các kim nhỏ
trong quá trình tiêm. Những tàn dư này được mô
tả ở đây. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
bộ quy trình trong một hệ thống kín, nhằm
giảm nhiễm trùng và oxy hóa của mô.
Vì không sử dụng vải nylon nên việc tiêm
ban đầu được thực hiện bằng một kim nhọn
25-GA, rộng hơn một chút so với kim được
sử dụng bởi Tonnard và cộng sự. Kim 25GA
được sử dụng như một bộ lọc cơ học cho
những phần tử không bị nhũ tương, đặc biệt
là trong mô liên kết. Đôi khi cần phải thay kim
nhiều lần trong quá trình làm thủ thuật vì nó
bị tắc bởi mô liên kết này.
Tất nhiên, việc sử dụng kim có đường
kính lớn hơn làm tăng sự xuất hiện của bầm
máu sau khi điều trị.
Một sự đổi mới là sự ra đời của Bộ công
cụ Nanofat (Nanofat Planas Kit), cho phép
một người thực hiện quá trình nhũ hóa và lọc
chất béo bằng một hệ thống hoàn toàn khép
kín.
Thiết bị này bao gồm hai ống tiêm 10
mL mỗi ống được kết nối với một thiết bị ba
chiều, một túi thu 10 mL với một sợi 120 μ
bên trong, và một ống tiêm 10 ml khác cho
chất béo nano – nanofat (Hình. 10.38).
Một bộ lọc lưới nylon với các lỗ lưới 120
μ là lựa chọn tối ưu với tầm nhìn vừa để ngăn
sản phẩm không bị vón cục hoặc tắc nghẽn
và giữ nguyên vẹn các tế bào gốc vì các lỗ hở
nhỏ có thể làm hỏng sản phẩm tế bào được
thu thập.
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
129
Hình. 10.38 Với thiết bị này, chúng tôi có thể thực
hiện nhũ hóa chất béo, chuyển chất béo 30 lần từ
ống tiêm này sang ống tiêm khác
Hình. 10.39 Bật đầu nối và gửi thành phần trong
ống tiêm vào túi thu gom, nơi các hạt còn sót lại
được lọc
Hình. 10.40 Xoay đầu nối và gửi thành phần trong
ống tiêm vào túi thu gom, nơi các hạt còn sót lại
được lọc
Hình. 10.41 Sau đó, thành phần được hút trực tiếp
qua ống tiêm 10 cc
Với thiết bị này, quá trình nhũ hóa chất béo
được thực hiện, bằng cách dịch chuyển chất
béo 30 lần giữa hai ống tiêm, thông qua đầu
nối 3 chiều. Khi hành động này đã được thực
hiện xong, đầu nối sẽ được xoay và gửi các
thành phần trong ống tiêm vào túi thu thập,
nơi các hạt còn sót lại được lọc; nội dung này
được hút trực tiếp qua ống tiêm 10 cc sau đó
(Hình 10.38, 10.39, 10.40, và 10.41).
Thông qua một đầu nối LuerLok, chất béo
nano được chuyển đến ống tiêm LuerLok 1
mL, và sau đó được thâm nhập bằng cách sử
dụng kim 27–30-GA (Hình 10.42 và 10.43).
10.3.8 Phân tích tế bào gốc Nanofat
Các mẫu chất béo đã được nhũ tương
hóa đã được gửi để đánh giá mô đến Phòng
thí nghiệm Tế bào gốc và Ung thư, tại Viện
Nghiên cứu Vall d´Hebron (Barcelona, Tây
Ban Nha). Sử dụng phương pháp đo tế bào
dòng chảy, sự hiện diện của các tế bào CD34
+ sống được đã được phân tích. Ngoài ra,
kiểm tra bằng kính hiển vi tương phản được
sử dụng để hiển thị các mô mỡ bị gián đoạn
và các tế bào chết (Hình 10,44 và 10,45,
tương ứng).
Sử dụng kính hiển vi huỳnh quang,
Tonnard và cộng sự cho rằng các tế bào mỡ
không thể sống được và cấu trúc mô mỡ
không bình thường đã được phát hiện khi
phân tích các mẫu chất béo đã được nhũ
tương hóa [25]. Tuy nhiên, khi nhũ tương này
được đưa qua máy phân loại tế bào được
kích hoạt từ tính để lựa chọn tế bào CD34 +,
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
130
Hình. 10.42 Thông qua đầu nối LuerLok, chất béo
nano được chuyển đến ống tiêm LuerLok 1 mL, và
sau đó được tiêm thâm nhập sử dụng kim 27–30-
GA
Hình. 10.44 Hình ảnh kỹ thuật số kính hiển vi
tương phản cho thấy mô mỡ bị vỡ và sự hiện diện
của các tế bào sáng sau quá trình nhũ hóa mô.
Kính hiển vi tương phản được sử dụng để xem các
mẫu vật không bị nhuộm màu bằng cách sử dụng
sự khác biệt về biên độ ánh sáng trong các vật liệu
sinh học dưới kính hiển vi
Hình. 10.43 Sự thẩm thấu qua da của chất béo
nano, quan sát chấm nhỏ màu vàng ở lớp hạ bì
Hình. 10.45 Phát hiện tế bào chết bằng cách sử
dụng kính hiển vi tương phản, hiển thị các tế bào
chứa chất béo nano có hình thái nhân phân mảnh
cũng như các dấu hiệu cụ thể khác của quá trình
chết tế bào theo chương trình. (Được xuất bản
dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
họ đã thu được các sản phẩm có chứa tối đa
100.000 tế bào CD34 + trên 100 mL mỡ hút
được. Phân loại tế bào từ tính cho phép phân
tách nhanh các tế bào mong muốn với sản
lượng và độ tinh khiết tuyệt vời, đồng thời duy
trì chức năng của tế bào. Tuy nhiên, độ tinh
khiết của các tế bào được phân loại không
phải là một thông số hiệu suất đủ và việc
phục hồi hầu hết các tế bào gốc có trong sản
phẩm chất béo ban đầu là rất mong chờ.
Để khắc phục những hạn chế liên quan
đến năng suất và / hoặc phục hồi số lượng
tế bào gốc sau khi tách tế bào từ tính, chúng
tôi đã thực hiện phép đo miễn dịch huỳnh
quang trực tiếp đối với số lượng tế bào tuyệt
đối CD34 + bằng phương pháp đo tế bào
dòng hội tụ âm. Trong nghiên cứu của chúng
tôi, phần còn lại tế bào từ chất béo được
nhũ tương hóa đồng thời được nhuộm bằng
kháng thể PE-CD34 và FITC-CD45, và Vybrant
(R) DyeCycle ™ Violet (DCV), một chất nhuộm
axit nucleic thấm tế bào có thể thâm nhập
vào nhân mà không cần cố định tế bào, và nó
tương thích với nhiều ứng dụng tế bào sống.
Một cách ngắn gọn, chất béo đã nhũ tương
được lọc qua lưới nylon 52 μm, và nước thải
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
131
đầu ra được thu thập cho các xét nghiệm đo
tế bào dòng chảy. Các phần chất béo nano
(100 μL) được nhuộm bằng PE-CD34, FITC-
CD45 và DCV trong 20 phút ở RT, được phát
hiện qua ánh sáng.
10.3.9 Phép đo lưu lượng tế bào
Tất cả các phép đo tế bào đều được thực
hiện bằng Máy đo tế bào tiêu điểm Attune®
(Life Technologies, Carlsbad, CA). Các mẫu
nanofat được nhuộm đồng thời bằng PE-
CD34, PE-CD133, FITC-CD45 và DCV. Filtre
kết hợp được sử dụng bao gồm 555 DLP,
BP 530/30 (FITC) và 620 DLP, 574/26 (PE).
Quá trình chuyển đổi bị dừng khi thu thập
được tối thiểu 10.000 sự kiện DCV + được
giám sát trực tiếp. FITC, PE và DCV huỳnh
quang được thu thập theo thang đo logarit.
10.4 Kết quả
10.4.1 Phân tích tế bào gốc
Tế bào CD34 + được phát hiện trong
chất béo nhũ tương (> 50% tổng số tế bào
DCV; Hình 10.46a), và gần một nửa số tế bào
CD34 + đồng biểu hiện CD45 (43,22%; Hình
10.46b), cho thấy nguồn gốc tạo máu của
chúng. Những kết quả này cho thấy sự phong
phú của các tế bào CD34 + từ các mẫu chất
béo nano, cho thấy rằng mô mỡ có thể tạo
thành một ổ chứa thiếu oxy cho các tế bào
gốc tạo máu CD34 +.
Sự tăng sinh trong các tế bào CD34 có
thể được giải thích bởi vì mô đệm có thể tạo
ra một cái bẫy để cô lập các tế bào CD34
+ tuần hoàn máu ngoại vi. Mô mỡ đặc biệt
thiếu oxy (40–50 mmHg), và đây có thể là lý
do giải thích cho sự xuất hiện của tế bào gốc
CD34 +, hỗ trợ cho một nhóm bằng chứng
ngày càng tăng cho thấy rằng nhiều loại tế
bào gốc khác nhau tồn tại trong một môi
trường thiếu oxy.
10.4.2 Nanofat: Bộ Goisis Nanofat Kit
Bộ công cụ Goisis ()
là một hệ thống để rửa chất béo và sản xuất
chất béo nano. Tất cả các thủ tục được thực
hiện bằng một hệ thống khép kín. Bằng cách
này, giảm nguy cơ nhiễm trùng và không có
sự tiếp xúc giữa chất béo và không khí.
Đặc biệt, microfat được thu hoạch bằng
cách sử dụng hộp microfat (
com).
Sau đó, ống tiêm chứa đầy microfat được
kết nối với bộ DE nanofat. Sản xuất chất béo
nano dựa trên một hệ thống khép kín, không
tiếp xúc với không khí.
Thủ tục rất nhanh chóng và hiệu quả. Đặc
biệt, chỉ
1,5 cc chất béo bị mất vào bộ DE nano-
fat (Hình 10,47, 10,48, 10,49a – c, 10,50,
10,51a, b, 10,52, và 10.53).
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
132
Hình. 10.46 (a) Các phép đo đại diện CD34 +
/ CD45 + trong chất béo nano. Chấm đo tế bào
dòng chảy hiển thị các tế bào CD34 + / CD45 + trên
Máy đo tế bào tiêu điểm Attune (Life Technologies)
được trang bị tia laser tím 50 mW phát ra ở bước
sóng 405 nm. (Được xuất bản theo sứ mệnh của
© Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu). (b)
Các phép đo đại diện CD34 + trong nanofat. Biểu
đồ chấm đo tế bào dòng hiển thị các tế bào Phân
tán bên so với CD34 + trên Máy đo tế bào tiêu điểm
Attune (Life Technologies) được trang bị tia laser
tím 50 mW phát ra ở bước sóng 405 nm. (Được
xuất bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.47 5 cc microfat được sản xuất bằng
hộp microfat (). (Được xuất bản
dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
Hình. 10.48 Bộ chất béo nano Goisis. (Được xuất
bản bởi sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
133
Hình. 10.49 (a) Ba ống tiêm 10 cc được kết
nối với bộ dụng cụ. Chất béo được di chuyển
giữa 2 ống tiêm 30 lần. (Được xuất bản dưới
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu). (b) Ba ống tiêm 10 cc
được kết nối với bộ dụng cụ. Chất béo được
di chuyển nhanh chóng giữa 2 ống tiêm30
lần. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo
lưu). (c) Ba ống tiêm 10 cc được kết nối với
bộ dụng cụ. Chất béo được di chuyển nhanh
chóng giữa 2 ống tiêm 30 lần. (Được xuất
bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.50 Chất béo microfat có màu vàng. Sau
30 lần, nó được biến đổi ở dạng nanofat, có màu
trắng. (Được xuất bản dưới sự cho phép của ©
Mario Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu
Hình. 10.51 (a, b) Nút vặn stopcock được chuyển
từ vị trí “a” sang vị trí “b”. (Được xuất bản dưới
sự cho phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền
được bảo lưu)
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
134
Hình. 10.52 Bằng cách này, chất béo được lọc và
chuyển trực tiếp vào ống tiêm thứ ba. (Được xuất
bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018.
Mọi quyền được bảo lưu)
Hình. 10.53 Vì đã qua quá trình lọc, chất béo có
thể được tiêm trực tiếp bằng kim 30-GA. (Được
xuất bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis
2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
e-bacsy.com
135
Tham khảo thêm
1. Bianchi F, Maioli M, Leonardi E, Olivi E,
Pasquinelli G, Valente S, Mendez AJ, Ricordi
C, Raffaini M, Tremolada C, Ventura C. A new
nonenzymatic method and device to obtain
a fat tissue derivative highly enriched in peri-
cyte-like elements by mild mechanical forces
from human lipoaspirates. Cell Transplant.
2013;22(11):2063–77.
2. Ventura C, Cantoni S, Bianchi F, Lionet-
ti V, Cavallini C, Scarlata I, Foroni L, Maioli M,
Bonsi L, Alviano F, Fossati V, Bagnara GP, Pas-
quinelli G, Recchia FA, Perbellini A. Hyaluro-
nan mixed esters of butyric and retinoic acid
drive cardiac and endothelial fate in term pla-
centa human mesenchymal stem cells and
enhance cardiac repair in infarcted rat hearts.
J Biol Chem. 2007;282(19):14243–52.
3. Cavallari G, Olivi E, Bianchi F, Neri F,
Foroni L, Valente S, Manna GL, Nardo B, Ste-
foni S, Ventura C. Mesenchymal stem cells
and islet cotransplantation in diabetic rats:
improved islet graft revascu- larization and
function by preconditioned with natural mol-
ecules. Cell Transplant. 2012;21(12):2771–
81.
4. Stavely R, Robinson AM, Miller S, Boyd
R, Sakkal S, Nurgali
K. Human adult stem cells derived from
adipose tissue and bone marrow attenu-
ate enteric neuropathy in the guinea-pig
model of acute colitis. Stem Cell Res Ther.
2015;6(1):244.
5. Wang W, He N, Feng C, Liu V, et al.
Human adipose-derived mes- enchymal pro-
genitor cells engraft into rabbit articular car-
tilage. Int J Mol Sci. 2015;16:12076–91.
6. Chang YH, Liu HW, Wu KC, Ding DC.
Mesenchymal stem cells and their clinical
applications in osteoarthritis. Cell Trans-
plant. 2016;25:937.
7. Sato M, Uchida K, Nakajima H, Mi-
yazaki T, Guerrero AR, Watanabe S, Roberts S,
Baba H. Direct transplantation of mesenchy-
mal stem cells into the knee joints of Hartley
strain guinea pigs with sponta- neous osteo-
arthritis. Arthritis Res Ther. 2012;14(1):R31.
8. Jo CH, Lee YG, Shin WH, Kim H, Chai
JW, Jeong EC, Kim JE, Shim H, Shin JS,
Shin IS, Ra JC, Oh S, Yoon KS. Intra-articu-
lar injection of mesenchymal stem cells for
the treatment of osteo- arthritis of the knee:
a proof-of-concept clinical trial. Stem Cells.
2014;32(5):1254–66.
9. Kølle SF, Fischer-Nielsen A, Mathiasen
AB, Elberg JJ, Oliveri RS, Glovinski PV, Kastrup
J, Kirchhoff M, Rasmussen BS, Talman ML,
Thomsen C, Dickmeiss E, Drzewiecki KT. En-
richment of autologous fat grafts with ex-vivo
expanded adipose tissue-derived stem cells
for graft survival: a randomised placebo-con-
trolled trial. Lancet. 2013;382(9898):1113–
20.
10. Trojahn Kolle SF, Oliveri RS, Glovinski
PV, et al. Pooled human platelet lysate ver-
sus fetal bovine serum—investigating the
pro- liferation rate, chromosome stability and
angiogenic potential of human adipose tis-
sue-derived stem cells intended for clinical
use. Cytotherapy. 2013;15:1086.
11. Chang H, Park JH, Min KH, Lee RS,
Kim EK. Whitening effects of adipose-de-
rived stem cells: a preliminary in vivo study.
Aesthet Plast Surg. 2014;38(1):230–3.
12. Kim WS, Park SH, Ahn SJ, Kim HK,
Park JS, Lee GY, Kim KJ, Whang KK, Kang
SH, Park BS, Sung JH. Whitening effect of
adipose-derived stem cells: a critical role of
TGF-beta 1. Biol Pharm Bull. 2008;31(4):606–
10.
13. Solano F, Briganti S, Picardo M, Gha-
nem G. Pigment Cell Res. 2006;19:550–71.
14. Won C. Hair growth promoting effects
of adipose tissue-derived stem cells. J Der-
matol Sci. 2010;57:132–46.
15. Shin H, Ryu HH, Kwon O, Park BS, Jo
SJ. Clinical use of condi- tioned media of
adipose tissue-derived stem cells in female
pat- tern hair loss: a retrospective case series
study. Int J Dermatol. 2015;54(6):730–5.
16. Fukuoka H, Suga H. Hair regeneration
treatment using adipose- derived stem cell
Chương 10
Mỡ và tế bào gốc
136
conditioned medium: follow-up with tricho-
grams. Eplasty. 2015;15:e10.
17. Strioga M, Viswanathan S, Darinskas
A, Slaby O, Michalek J. Same or not the
same? Comparison of adipose tissue-de-
rived versus bone marrow-derived mesen-
chymal stem and stromal cells. Stem Cells
Dev. 2012;21:2724–52.
18. Tremolada C, Palmieri G, Ricordi C.
Adipocyte transplantation and stem cells:
plastic surgery meets regenerative medicine.
Cell Transplant. 2010;19(10):1217–23.
19. Wang W, Fang XH, Williams SJ, et al.
Lidocaine-induced ASC apoptosis (tumes-
cent v. local anesthesia). Aesthet Plast Surg.
2014;38:1017–23.
20. Goldman JJ, Wang WZ, Fang XH,
Williams SJ, Baynosa RC. Tumescent li-
posuction without lidocaine. Plast Reconstr
Surg Glob Open. 2016;4(8):e829.
21. Bowen JE. Technical issues in har-
vesting and concentrating stem cells (bone
marrow and adipose). PM R. 2015;7:S8–S18.
22. Vincent L, Chen W, Hong L. Inhibition
of endothelial cell migra- tion by cerivastatin,
an HMG-CoA reductase inhibitor: contribu-
tion to its anti-angiogenic effect. FEBS Lett.
2001;495:159–66.
ebasy.com
137
Phần II
theo từng bước
Thẩm mỹ nội khoa
138
139
Chương
11
e-bacsy.com
Hõm thái dương
Mario Goisis, Sara Izzo
và
Rand S. Al Yahya
Chương 11
Hõm thái dương
140
Tình trạng lõm vùng thái dương có xu
hướng ngày càng rõ hơn theo tuổi tác. Điều
này một phần là do teo mỡ và một phần do
cơ thái dương bị teo. Ở một số đối tượng,
vùng lõm đã xuất hiện ngay từ khi còn nhỏ.
Việc lõm ở khu vực này thường gắn liền
với hình dạng giống như đầu lâu. Hõm thái
dương được coi là một trong những dấu hiệu
lão hóa phản thẩm mỹ tồi tệ nhất liên quan
đến vùng mặt trên.
11.1 Giải phẫu
Hõm thái dương là một chỗ lõm ở mỗi
bên của hộp sọ được giới hạn phía trên bởi
sự chèn ép của cơ thái dương và kết thúc bên
dưới ở mức của cung gò má. Ranh giới phía
trước được tạo thành bởi bề mặt sau của rãnh
trán xương gò má và bề mặt phía sau rãnh
gò má của xương trán. Đặc biệt, phần xương
được phân định bằng một đường cong qua
hộp sọ từ rãnh gò má của xương trán đến
mào trên của xương thái dương. Ranh giới
dưới được biểu hiện ở bên ngoài bởi cung
gò má và ở bên trong là mào thái dương của
cánh lớn xương bướm (Hình 11.1). Các cấu
trúc chứa trong hõm thái dương cần được
bảo tồn trong quá trình xử lý là những cấu
trúc sau:
•
Động mạch thái dương nông là động
mạch chính của đầu. Nó phát sinh từ
động mạch cảnh ngoài khi nó phân
đôi vào động mạch thái dương nông
và động mạch hàm trên. Nó bắt đầu ở
tuyến mang tai, đi phía sau cổ của hàm
dưới, và đi qua bề mặt nông của rãnh gò
má xương thái dương; khoảng 5 cm trên
rãnh này, nó chia thành hai nhánh, một
nhánh trước và một nhánh định. Có thể
sờ thấy mạch của nó phía trên cung gò
má, khoảng 1 cm phía trước và phía trên
bình tai (Hình 11.2, mũi tên màu xanh
Hình. 11.1 Giải phẫu xương của hố thái dương.
Tái tạo một tấm biểu đồ từ Grey’s anatomy (Henry
Grey, Giải phẫu: Mô tả và Phẫu thuật). (Được xuất
bản dưới sự cho phép của © Mario Goisis 2018.
Mọi quyền được bảo lưu)
lam).
•
Các nhánh trên cùng của dây thần kinh
sọ thứ bảy, còn được gọi là nhánh trán
của dây thần kinh mặt, đi qua cung gò
má đến vùng thái dương, cung cấp cho
các cơ trên và trước tai. Các nhánh đặt
gần mặt trước nhất cung cấp cho cơ
trán, cơ vòng ổ mắt, và cơ cau mày.
Nhánh cắt ngang qua vòm zygomat-
ic 3–4 cm ở phía trước khí quản và đi
vào hố thái dương, ngay dưới lớp màng
sau. Tổn thương ngẫu nhiên của nhánh
thái dương dẫn đến sự bất đối xứng
trên khuôn mặt do chức năng một bên
không đủ của cơ trán và siêu cơ gấp nếp
(Hình.11.3).
M. Goisis (*)
Phẫu thuật viên thẩm mỹ và hàm mặt, Bệnh viện Go Easy, Milan, Italy
S. Izzo
Khoa phẫu thuật thẩm mỹ, Đại học Campania “Luigi Vanvitelli”, Naples, Italy
R. S. Al Yahya
Đại học Prince Sattam Bin Abdulaziz, Al Kharj, Saudi Arabia
Quy trình PRP và tiêm cấy mỡ Nâng Cao
141
e-bacsy.com
Hình. 11.3 (a, b) Nhánh trán (a) (b) của dây thần
kinh mặt đi qua cung gò má đến tận vùng thái
dương, cung cấp cho cơ trên và trước vùng tai.
Hầu hết các nhánh phía trước (mũi tên màu xanh
lam) cắt qua cung gò má 3–4 cm trước bình tai và
Hình. 11.2 Động mạch thái
dương nông phát sinh từ
động mạch cảnh ngoài. Nó
bắt nguồn từ tuyến mang tai,
đi sau cổ của hàm dưới. Có
thể sờ thấy mạch của nó phía
trên cung gò má, khoảng 1 cm
phía trước và phía trên bình
tai (mũi tên màu xanh). (Được
xuất bản dưới sự cho phép
của © Mario Goisis 2018. Mọi
quyền được bảo lưu)
đi vào hố thái dương lan rộng ra ngay dưới cân
cơ tai thái dương. (Được xuất bản dưới sự cho
phép của © Mario Goisis 2018. Mọi quyền được
bảo lưu)
Khu vực thái dương
Khu vực thái dương
11.2 Cạm bẫy
Các cấu trúc dễ tổn thương, chẳng hạn
như động mạch thái dương và dây thần kinh,
có thể được bảo tồn bằng cách sử dụng điểm
tiêm chính xác (điểm an toàn). Điểm an toàn
nằm cách 2,5 cm về phía bên rìa của khoang
ổ mắt (Hình 11.4a, c) và 2,5 cm phía trên
giới hạn trên của cung gò má (Hình 11.4b.).
Động mạch thái dương có thể sờ thấy. Xung
có thể được truy xuất từ phía trước từ bình
tai đến tận vùng thái dương. Điểm an toàn
thường cách mặt trước của mạch máu này ít
nhất 2 cm (Hình 11.4a, c). Dây thần kinh mặt
thường nằm dưới điểm an toàn ít nhất 2 cm
(Hình.11.4a, c).
Chương 11
Hõm thái dương
142
Hình. 11.4 (a, b, c) Gây tê được thực hiện ở điểm
an toàn với 0,2 cc dung dịch Klein. Điểm tiêm an
toàn nằm cách giới hạn ngoài của khoang ổ mắt
2 cm và cách giới hạn trên của cung gò má 2 cm.
(Được xuất bản dưới sự cho phép của © Mario
Goisis 2018. Mọi quyền được bảo lưu)
Điểm an
toàn
11.3 Làm đầy hõm thái dương
Việc chỉnh sửa hõm thái dương có thể
dẫn đến sự cải thiện đáng kể về diện mạo
của khuôn mặt, mang lại một cái nhìn trẻ hơn
về bệnh nhân. Chỉnh sửa vùng thái dương là
một thủ thuật đơn giản, có thể thực hiện trong
y khoa dưới sự gây tê tại chỗ. Chỉ một số cấu
trúc cần được bảo tồn, nhưng điều này có thể
được thực hiện một cách đơn giản.
11.4 Làm đầy hõm thái dương
bằng Microfat: Kỹ thuật tiêm
sâu
11.4.1 Chỉ định
Đánh dấu vùng lõm khu vực thái dương.
11.4.2 Chống chỉ định
Thay đổi giải phẫu do chấn thương trước
đó hoặc can thiệp phẫu thuật (phẫu thuật
thần kinh). Sẹo thường gây ra sự thay đổi vị trí
của các cấu trúc và có thể dẫn đến sự xuyên
thủng của động mạch thái dương hoặc phần
dây thần kinh. Nó cũng có thể tạo ra các vết
sẹo co rút có thể gây ra sự không đối xứng và
không đồng đều của phần được điều trị.
Không nên tiêm chất béo ở những vùng
thiếu cung cấp máu hoặc bị ảnh hưởng bởi
nhiễm trùng hoặc viêm.
Không nên thực hiện tiêm nếu vùng đầu
đã được điều trị trước đó bằng silicone lỏng
hoặc các chất độn vĩnh viễn khác vì mũi tiêm
mới có thể dẫn đến viêm hoặc nhiễm trùng
mô cấy.
11.4.3 Thời gian phẫu thuật
Sau khi thu hoạch chất béo, quy trình này
thường mất từ 10 đến 15 phút.
11.4.4 Vật liệu
2–4 cc microfat mỗi bên để tiêm:
•
Kim 21 G.
•
Ống cannula đầu tù 22 G 4 cm.
Để thu hoạch và xử lý microfat: Một hệ
thống tiêu chuẩn cho microfat được sử dụng,
cụ thể là:
•
Hộp microfat (), bao
gồm một hệ thống dốc với hệ thống
khép kín để rửa và lọc.
•
4 ống tiêm 60 cc.
•
2 ống tiêm 10 cc.
•
Một ống tiêm 1 cc.
•
Kim 30G.
